DNA Assembly Mix Smart:打破无缝克隆边界,告别实验玄学
做分子克隆的你,是否也常被这些问题困住:
繁琐的步骤、苛刻的条件、不稳定的结果,让本该高效的克隆实验变成了科研路上的"耗时大坑"。
现在,一款真正直击实验痛点的全新无缝克隆试剂来了——DNA Assembly Mix Smart 重磅上市。针对传统无缝克隆的四大核心难题全面升级,用更强的耐受性、更高的连接效率、更稳的产品性能、更宽的用量冗余,重新定义无缝克隆实验体验。
01 耐受性升级:未纯化PCR产物直接用,省步更减损
传统无缝克隆对底物纯度要求极高,PCR产物必须经过纯化才能用于反应,不仅多出1~2小时的实验流程,还容易造成珍贵样品的损失,尤其对低丰度样品极不友好。
DNA Assembly Mix Smart针对性优化了反应体系的抗干扰能力,大幅提升对未纯化PCR产物的耐受性。这意味着,在常规场景下,你可以减少纯化步骤,缩短实验周期,降低回收损失。
使用愚公生物EG26208 (DNA Assembly Mix Smart) 和EG24204 (DNA Assembly Mix Ultra)对不同品牌高保真PCR mix的未纯化产物进行连接,结果显示,EG26208可有效兼容不同品牌高保真PCR mix的未纯化产物。

愚公生物EG26208和EG24204使用不同品牌高保真酶PCR Mix未纯化产物分别连接单片段和多片段的转化子数与阳性率
注:以上PCR产物均没有明显杂带,否则阳性率会显著下降。
使用愚公EG24110和竞品W的未纯化PCR产物比较不同品牌无缝克隆产品对PCR产物的耐受性,结果显示,愚公EG26208在不同场景下对未纯化产物的耐受性均处于最佳梯队。

不同品牌无缝克隆产品使用2种品牌扩增的未纯化产物分别连接单片段与多片段的转化子数与阳性率
对于高通量筛选、批量构建和紧急实验来说,省下的不只是时间,更是成功率。
02 高效多片段组装:1~15个片段随心连,复杂构建不再难
从单片段插入到多基因串联组装,片段数量越多,连接难度呈指数级上升。普通试剂盒往往只能高效完成2~3个片段的连接,超过5个片段就阳性率骤降,反复优化也难以突破。
凭借优化的酶系配比与反应缓冲体系,DNA Assembly Mix Smart可实现1~15个DNA片段的高效无缝连接。无论是简单的载体构建,还是复杂的多基因组装、大片段拼接,都能保持高阳性率,大幅减少重复实验次数,让复杂载体构建不再是项目瓶颈。
将LacZ全长基因拆分成15个片段后连接至5k的载体后转化至大肠杆菌感受态,经IPTG诱导后阳性菌落在X-gal平板显蓝色,并挑取10个蓝色菌落进行菌落PCR,结果显示,菌落数与阳性率表现优异。

EG26208连接15个片段的平板菌落示意及菌落PCR结果
03 强稳定性配方:无惧氧化与反复冻融,结果更可控
试剂盒稳不稳,不看刚到货那板数据,看开盖一个月后、冻融十几轮后还顶不顶用。
DNA Assembly Mix Smart采用特殊优化的配方,兼具强抗氧化能力与耐反复冻融特性。即使多次冻融循环、常规开盖使用,酶活性仍能保持在较高水平,长期储存性能更稳定。这对实验室意味着三件实在事:
EG26208在冻融20次条件下或高温+氧化双重胁迫下连接效率无下降。

EG26208分别在冻融20次条件下或高温+氧化处理后的转化子数与阳性率
从此不用再担心"酶放久了不好用",实验结果更可控,重复实验更省心。
04 宽范围用量冗余:1/5~5倍底物兼容,新手也能零失误
底物投入量是克隆实验的关键参数之一。常规试剂盒对底物浓度要求苛刻,用量偏高或偏低都会显著影响连接效率,新手往往需要多次预实验摸索条件,耗费大量样品与时间。
DNA Assembly Mix Smart拥有极宽的底物兼容范围,0.006~0.15 pmol 的底物用量区间均可高效反应,覆盖常规底物投入量的1/5~5倍。无需反复摸索最佳用量,即使加样有一定误差也能获得理想结果,对新手是容错,对老手是高通量。自动工作站、批量构建、筛库项目里,投料不卡边界,通量和重现性一起上来。
EG26208在0.006~0.15 pmol载体用量范围内有较好的连接效果

注:片段与载体的摩尔比均为2:1
EG26208在0.006~0.15 pmol载体用量范围内连接的转化子数与阳性率
✦写在最后
为什么说它更"Smart"?
因为它把克隆实验中那些容易翻车的环节,尽量变得简单:
提升未纯化PCR产物耐受性,减少纯化依赖;
1~15片段高效连接,多片段不再可怕;
抗氧化、耐反复冻融,试剂状态更稳定;
0.006~0.15 pmol宽窗口,底物投入更宽容。
科研的时间,应该花在真正的科学问题上,
而不是耗在反复试错的克隆步骤里。
克隆可以更简单,组装可以更Smart。
DNA Assembly Mix Smart,
让每一次无缝克隆都更有把握。


